期刊简介

               本刊的办刊宗旨是宣传党的卫生工作政策,坚持“双百”方针,立足深圳,倚托港澳,面向全国,放眼世界,重点报道中西医结合临床和科研的新成果、新进展,新经验,加强国内外学术交流,促进中西医结合事业的繁荣与发展。                

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  • 杂志名称:深圳中西医结合杂志
  • 主管单位:深圳市卫生和人口计划生育委员会
  • 主办单位:深圳市中西医结合临床研究所
  • 国际刊号:1007-0893
  • 国内刊号:44-1419/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中)
深圳中西医结合杂志2015年第19期

CRISPR敲减猪CMAH基因的质粒构建及慢病毒的包装

牟丽莎;王蕾;谢崇伟;蔡志明

关键词:慢病毒包装, 基因敲减, CMAH基因, CRISPR-Cas9
摘要:目的:构建靶向猪CMAH基因的慢病毒CRISPR-Cas9敲减质粒及进行慢病毒的包装.方法:设计并合成CMAH基因gRNA的靶序列并将其与LentiCRISPR-v2载体连接;连接后转化大肠杆菌DH5α,筛选出重组子后酶切鉴定与测序;制备VSV-G、Rev、Gag/Pol等质粒用于包装慢病毒.结果:成功构建猪CMAH基因CRISPR-Cas9敲减质粒并包装出相应慢病毒.结论:利用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够构建敲减猪CMAH基因的质粒并能够使用其包装出病毒,为后续感染猪动脉内皮细胞(porcine aorta endothelial cell,PAEC)细胞敲减CMAH基因及功能验证奠定基础.